問題詳情:
菌落總數可作爲判定食品被污染程度的標誌,也可以用於觀察細菌在食品中繁殖的動態,以便對送檢樣品進行衛生學評估提供*據。下圖是某樣品培養簡化流程圖,請分析回答下列問題:
(1) 該營養瓊脂培養基配製過程中,其基本步驟包括按照培養基*準確計算、稱量、溶化、調節pH、____法滅菌等。然後將培養基放入47 ℃水浴鍋保溫,選擇此溫度的理由是____。
(2) 實驗過程中須將樣品剪碎並使用均質器10 000 r·min-1處理1 min,其目的是________。從水浴鍋取出營養瓊脂培養基倒平板適量,稍冷卻後移液1 mL於培養皿進行塗布,塗布時可____,使塗布更均勻。
(3) 本實驗用菌落計數的原理是基於____,運用這種方法統計的結果往往較實際值偏____。具體培養結果如下表。選取菌落數30~300的培養皿作爲菌落總數的測定標準。當只有一個稀釋梯度的平均菌落數符合此範圍,以該培養皿菌落數×稀釋倍數報告。當有兩個梯度菌落值在30~300之間,報告結果由二者菌落數比值決定,若比值不大於2,則取平均數,且菌落數大於100取兩位有效數字,兩位之後的數值四捨五入;若比值大於2,則報告稀釋度較低(稀釋次數越多,稀釋度越高)的培養皿菌落數。請填寫例次2、3中“?”處的菌落總數分別爲____、____。
例次 | 不同稀釋度平均菌落數 | 兩稀釋度菌 落數之比 | 菌落總數 | ||
10-1 | 10-2 | 10-3 | |||
1 | 1 365 | 164 | 20 | — | 16 400 |
2 | 2 760 | 295 | 46 | 1.6 | ? |
3 | 2 890 | 271 | 60 | 2.2 | ? |
【回答】
高壓蒸汽 保*培養基處於溶化狀態(在凝固之前接種且不致將培養物燙死) 儘量使樣品中的微生物細胞分散 轉動培養皿 一個菌落代表一個活菌 小 38000 27100
【分析】
各種培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽,此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及溫度的要求。根據培養基中是否含有瓊脂,即瓊脂的多少可以將培養基分爲固體培養基、液體培養基和半固體培養基。製備固體培養基的方法:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。
【詳解】
(1)配製培養基時應按照培養基*準確稱量各組分,將其溶解、定容後,調節培養基的pH,並進行高壓蒸汽滅菌;然後將培養基放入47 ℃水浴鍋保溫,用手觸摸不燙手還便於*作,並能保*培養基處於溶化狀態,且在凝固之前接種不致將培養物燙死。
(2) 實驗過程中要將樣品剪碎並使用均質器10 000 r·min-1處理1 min,儘量使樣品中的微生物細胞分散;爲了使塗布更均勻,塗布時可轉動培養皿。
(3) 當樣品的稀釋度足夠高時,培養基表面生長的一個菌落,來源於樣品稀釋液中的一個活菌,因此一個菌落可代表一個活菌。但在培養過程中,可能不是一個活菌形成一個菌落,因此運用這種方法統計的結果往往較實際值偏小。結合題幹可知,報告菌落總數時,應選取菌落數30~300的培養皿作爲菌落總數的測定標準。當有兩個梯度菌落值在30~300之間時,報告結果由二者菌落數比值決定,若比值不大於2,則取平均數,且菌落數大於100取兩位有效數字,兩位之後的數值四捨五入;若比值大於2,則報告稀釋度較低的培養皿菌落數。因此例次2應選擇10-2和10-3的菌落數,且295記爲30,該培養皿菌落數爲(30+46)÷2=38,故例次2的菌落總數爲該培養皿菌落數×稀釋倍數,既38×1000=38000,例次3應選取10-2的菌落數報告,則3菌落總數爲271×100=27100。
【點睛】
本題旨在考查微生物的分離和培養、某種微生物數量的測定,意在考查具備驗*簡單生物學事實的能力,並能對實驗現象和結果進行處理和報告,具有對一些生物學問題進行初步探究的能力。
知識點:微生物的培養與應用
題型:綜合題