問題詳情：
2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠*熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻的科學家．綠*熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發下發出熒光，這樣藉助GFP發出的熒光就可以跟蹤蛋白質在細胞內部的移動情況，幫助推斷蛋白質的功能．如圖1爲我國首例綠*熒光蛋白（GFP）轉基因克隆豬的培育過程示意圖，據圖回答： 
（1）圖中透過過程①、②形成重組質粒，需要限制*內切酶切取目的基因、切割質粒．限制*內切酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-，限制*內切酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-．在質粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側各有1個酶Ⅱ的切點． ①如圖2所，請畫出質粒被限制酶Ⅰ切割後所形成的黏*末端． ②在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割後形成的黏*末端能否連接？理由是： ． （2）過程③將重組質粒匯入豬胎兒成纖維細胞時，採用最多也最有效的方法是 ． （3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作爲基因表達載體上的標記基因，其作用是 ．獲得的轉基因克隆豬，可以解決的醫學難題是，可以避免 ． （4）目前科學家們透過蛋白質工程製造出了藍*熒光蛋白，黃*熒光蛋白等，採用蛋白質工程技術製造出藍*熒光蛋白過程的正確順序是： （填序號）． ①推測藍*熒光蛋白的氨基*序列和基因的核苷* ②藍*熒光蛋白的功能分析和結構設計序列 ③藍*熒光蛋白基因的修飾（合成） ④表達出藍*熒光蛋白．
【回答】
解：（1）①限制酶識別特定的核苷*序列，並在特定的切割位點切割，產生粘*末端．限制酶Ⅰ和Ⅱ切割後產生的粘*末端相同，即均產生GATC序列，因此可以用DNA連接酶連接起來． ②在DNA連接酶的作用下，由於兩種不同限制酶切割後形成的黏*末端是相同的，因此上述兩種不同限制酶切割後形成的黏*末端可以連接． （2）將重組質粒匯入動物細胞的方法是顯微注*法． （3）標記基因是爲了鑑定受體細胞中是否含有目的基因． （4）蛋白質工程的基本途徑是：從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基*序列→找到相對應的脫氧核苷*序列→相應基因的修飾改造或人工合成→相應的表達． 故*爲： （1）①
②可以連接 因爲由兩種不同限制酶切割後形成的黏*末端是相同的 （2）顯微注*技術 （3）爲了鑑定受體細胞中是否含有目的基因 發生免疫排斥反應 （4）②①③④
知識點：克隆技術
題型：填空題
