問題詳情：
31.（18分）科學家將外源目的基因與大腸桿菌的質粒進行重組，並在大腸桿菌中成功表達。下圖表示構建重組質粒和篩選含目的基因的大腸桿菌的過程。請據圖回答問題：
（1）步驟①和②中常用的工具酶是 和 。
（2）圖中質粒上有抗氨苄青黴素和抗四環素兩個標記基因，經過①和②步驟後，有些質粒上的 基因內*入了外源目的基因，形成重組質粒，由於目的基因的分隔使得該抗*基因失活。
（3）步驟③是 的過程，爲了促進該過程，應該用 處理大腸桿菌。
（4）步驟④：將三角瓶內的大腸桿菌接種到含四環素的培養基C上培養，目的是篩選
，能在C中生長的大腸桿菌有 種。
（5）步驟⑤：用無菌牙籤挑取C上的單個菌落，分別接種到D（含氨苄青黴素和四環素）和E（含四環素）兩個培養基的相同位置上，一段時間後，菌落的生長狀況如圖所示。含目的基因的菌落位於 （D、E）上，請在圖中相應的位置上圈出來。
【回答】
31.（18分）
（1）限制*核*內切酶 DNA連接酶
（2）氨苄青黴素抗*基因
（3）將重組質粒（目的基因）匯入大腸桿菌（受體細胞） CaCl2溶液
（4）含四環素抗*基因的大腸桿菌（含抗*基因的大腸桿菌給分，但回答含目的基因的大腸桿菌不給分） 2
（5）E
評分標準：在兩個菌落中圈一個也可給2分
知識點：生物技術的安全*和倫理問題
題型：綜合題
