問題詳情:
Ⅰ型糖尿病是因免疫系統將自身胰島素作爲抗原識別而引起的自身免疫病。小腸黏膜長期少量吸收胰島素抗原,能誘導免疫系統識別該抗原後應答減弱,從而緩解症狀。科研人員利用Ⅰ型糖尿病模型小鼠進行動物實驗,使乳*菌在小鼠腸道內持續產生人胰島素抗原,爲此構建重組表達載體,技術路線如下。
據圖回答:
(1)爲使人胰島素在乳*菌中高效表達,需改造其編碼序列。下圖是改造前後人胰島素B鏈編碼序列的起始30個核苷*序列。據圖分析,轉錄形成的mRNA中,該段序列所對應的片段內存在鹼基替換的密碼子數有________個。
(2)在人胰島素A、B肽鏈編碼序列間引入一段短肽編碼序列,確保等比例表達A、B肽鏈。下列有關分析正確的是________。
A.引入短肽編碼序列不能含終止子序列
B.引入短肽編碼序列不能含終止密碼子編碼序列
C.引入短肽不能改變A鏈氨基*序列
D.引入短肽不能改變原人胰島素抗原*
(3)在重組表達載體中,SacⅠ和XbaⅠ限制酶僅有圖示的酶切位點。用這兩種酶充分酶切重組表達載體,可形成________種DNA片段。
(4)檢測轉化的乳*菌發現,信號肽-重組人胰島素分佈在細胞壁上。由此推測,信號肽的合成和運輸所經歷的細胞結構依次是________________________________。
(5)用轉化的乳*菌飼餵Ⅰ型糖尿病模型小鼠一段時間後,小鼠體內出現人胰島素抗原,能夠特異*識別它的免疫細胞有________。
A.B細胞 B.T細胞 C.吞噬細胞 D.漿細胞
【回答】
(1). 6 (2). ABCD (3). 3 (4). 核糖體、細胞質基質、細胞膜、細胞壁 (5). AB
【解析】
【分析】
本題以自身免疫病和Ⅰ型糖尿病爲背景,考查了基因工程的相關知識,乳*菌是原核細菌,要表達人體的人胰島素抗原,必須透過基因工程技術才能實現。圖示中將人胰島素編碼序列進行了改造,再與一小段短肽編碼序列結合形成重組人胰島素編碼序列,進而構成重組表達載體。
【詳解】(1)從圖示可知,改造前後人胰島素B鏈編碼序列的起始30個核苷*序列有7個核苷*發生了替換,則其轉錄形成的mRNA中,也會有7個核苷*發生改變,一個密碼子由mRNA上三個連續的鹼基組成,由此可知,該段序列所對應的片段內存在鹼基替換的密碼子數有6個。 (2)要確保等比例表達A、B肽鏈,則需A、B肽鏈一起合成,即啓動子和終止子在人胰島素A、B鏈編碼序列兩端,在其中間加入一段短肽編碼序列後,序列中間不能出現終止子,所轉錄得到的mRNA中間也不能出現終止密碼子,同時不能改變肽鏈的氨基*序列和它的功能,綜上,*選ABCD。 (3)在重組表達載體中,SacⅠ和XbaⅠ限制酶切位點分別有2個和1個,當將重組表達載體用SacⅠ和XbaⅠ限制酶充分酶切後,會形成3個缺口,得到3種不同的DNA片段。 (4)乳*菌屬於原核細胞,其細胞壁上的信號肽在覈糖體上合成後,到細胞質基質中加工,再將其運輸到細胞膜上,進而轉移到細胞壁。 (5)人胰島素抗原能引起小鼠的特異*免疫,在特異*免疫過程中,B細胞和T細胞能特異*識別抗原,而吞噬細胞能識別抗原,但不是特異*識別,漿細胞不能識別抗原。
【點睛】本題綜合考查細胞的結構和功能、免疫調節和基因工程等相關的知識點,考向靈活,各知識點聯繫緊密,需認真審題。
知識點:人和高等動物的體液調節
題型:綜合題